液质联用,又称液相色谱串联质谱法,以液相色谱作为分离系统,质谱作为检测器,将液相色谱对复杂样品的高分离能力和质谱的高选择性,高灵敏度的优势结合起来,达到准确定量分析的目的。液质联用在药物研发,环境分析,食品分析,临床医学等领域广泛应用,可完成体外、体内药代动力学,样本中分析物含量测定等。方法学开发的目的就是提高分析灵敏度,降低干扰,获得好的重现性,以达到准确测定生物基质中的药物浓度。
色谱仪Thermo UltiMate 3000 RS,质谱仪Thermo TSQ Quantun
①含报告提供方法检测下限,线性范围(根据真实样本调整),样品检测结果,详细色谱质谱条件,不做多基质条件的摸索;②报告提供方法检测下限,上下限的倍数关系,详细色谱质谱条件,不做基质条件的摸索。
标准品配制→确定质谱条件→确定色谱条件→确定检测下限→验证线性范围
标准曲线配制→样本前处理→上机检测→数据导出、处理
1、细胞样本
①细胞量1×107个,收集细胞沉淀,-80℃保存,纯干冰运输,避免反复冻融。
②收集时,用预冷PBS缓冲液清洗三次,去除培养基成分,然后离心去除上清保存。
③如需要进行细胞计数,则需送样前进行。
2、全血样本
①样本量200 μL,EDTA、EDTA-K2或肝素钠抗凝,4℃保存,冰袋运输,避免剧烈振荡和冷冻结冰。
②由于全血常规保存期为7天,如需检测,需要提前至少1周联系实验室确认周期情况,以便沟通协调安排检测。
3、血清、血浆样本
①样本量100 μL,-80℃保存,纯干冰运输,避免反复冻融及溶血。
4、尿液样本
①样本量200 μL,-80℃保存,纯干冰运输,避免反复冻融及带入粪便残渣。
5、动物组织样本
①样本量300 mg,-80℃保存,纯干冰运输,避免反复冻融。
②收集时,用预冷PBS缓冲液冲洗表面血液,并用滤纸吸干多余水分,避免冻存时结冰。
③固定液浸泡过的样本无法进行检测。
6、植物组织样本
①样本量500 mg,-80℃保存,纯干冰运输,避免反复冻融。
②收集时,用预冷PBS缓冲液冲洗表面泥沙,并用滤纸吸干多余水分,避免冻存时结冰。
③固定液浸泡过的样本无法进行检测。