甲基化特异性的PCR技术((methylation-specific PCR, MSP)是在亚硫酸盐处理基因组DNA后,所有未发生甲基化的胞嘧啶(C)被转化为尿嘧啶(U)而甲基化的胞嘧啶则不变,设计两对引物,即一对扩增甲基化DNA链(引物对M),另一对扩增非甲基化DNA链(引物对U),电泳检测引物M和U是否扩增成功,来判断某个基因的甲基化情况。
DNA抽提→亚硫酸氢盐处理→引物设计及扩增→挑选克隆测序→数据分析
1. 组织、细胞:-80℃保存,干冰运输;
2. 血液:EDTA抗凝管,4℃运输;
3. DNA:体积≥50μl,浓度≥50 ng/μl,4℃运输。