肿瘤细胞悬浮成球实验被认为是获取具有干性肿瘤细胞的试验之一
1. 取对数生长期细胞，消化；
2. 用DMEM/F12培养基清洗一遍，弃上清，干细胞培养液（DMEM/F12作为基础培养基，添加N2、B27、20ng/ml EGF和20ng/ml bFGF）重悬；
3. 按照1个细胞每孔的密度接种至96孔板中，每孔120μＬ，每隔1d添加20μＬ干细胞培养液；
4. 记录肿瘤球在２周内的情况，球径大于20μｍ 的球体纳入计数范围。
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