皮肤是人体最大的器官,也是体内和外界的屏障,它包含表皮层和真皮层2部分,其中表皮包括基质层、棘层、肉芽层、角质层;目前烧伤、外科手术皮肤缺损,慢愈性皮肤病急需新的皮肤替代物,而且皮肤替代物在皮肤病的药物研究中发挥重要作用,由于人体真实皮肤模型不可行,动物模型不能针对性代表药物对人体皮肤的作用,所以体外构建3D皮肤模型具有重大意义。
1. 复苏细胞时,从超低温相中取出冻存细胞,迅速将冻存管放入提前预热的37℃水浴锅。
2. LPS 诱导的细胞炎症模型:首先将LPS稀释1μg/ml 的工作液,从恒温培养箱中取出细胞,在显微镜下观察,更换新的培养液并向细胞培养液中加入预先配置好的浓度为 1μg/ml 的 LPS,放入恒温培养箱中继续培养,至合适的时间点,进行后续试验。
3. CCK-8检测细胞生存率、Western 蛋白定量检测