免疫荧光是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物,再用这种荧光抗体(或抗原)作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光(黄绿色或桔红色),可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质、定位,以及利用定量技术测定含量。
小鼠胰腺-免疫荧光(双标)
石蜡切片脱蜡至水→抗原修复→5%羊血清封闭→加一抗→加二抗→DAPI封片→荧光显微镜下观察,照片采集
1.样本放置于25倍样本体积的固定液中固定至少24 h(切勿固定时间过长,切勿冷冻结冰),常温运输送样。
2.石蜡切片常温运输,冰冻切片-20℃运输。
3、细胞爬片用固定液浸泡,4℃保存和运输