根据抗原抗体反应和化学显色原理,组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合,再利用一抗与标记生物素等的二抗进行反应,再用标记辣根过氧化物酶(HRP)等的抗生物素结合,最后通过呈色反应来显示细胞或组织中化学成分,在光学显微镜下可清晰看见组织细胞内发生的抗原抗体反应产物,从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。
人浸润性乳腺癌组织免疫组化
1 石蜡切片脱蜡至水→抗原修复→3%H2O2溶液封闭内源性过氧化物酶→5%羊血清封闭→加一抗→加聚合物辅助剂→加山羊抗兔/小鼠种属通用型二抗→DAB显色→苏木素复染→脱水透明封片→显微镜镜检,图像采集
1、样本放置于25倍样本体积的固定液中固定至少24h(切勿固定时间过长,切勿冷冻结冰),常温运输送样。
2、石蜡切片常温运输,冰冻切片-20℃运输。
3、细胞爬片用固定液浸泡,4℃保存和运输