免疫电镜检查(immunoeletron microscopy,IEM)是免疫组织化学技术与透射电镜技术相结合,在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法。利用带有特殊标记的抗体与抗原结合,根据标准物形成一定的电子密度而指示出相应抗原所在的部位,能够对未知抗原进行早期的诊断。
FA+GA固定→切片→免疫标记及染色→透射电镜观察→拍照
以下所有样本必须尽量新鲜,固定液或悬浮液都不得冷冻结冰!
1. 电镜检测取材较为严格,取材需要迅速,材料块要小,固定液和材料比例为10:1。使用4%多聚甲醛加少量新鲜配制的戊二醛固定,使其终浓度为0.5%~1%。4℃保存或冰浴(条件允许,推荐)运输至我方。
2. 外秘体囊泡等用缓冲液(如PBS)或者试剂盒中的保存液悬浮,远距离-80℃冻存运输,近距离4℃保存运输,尽快制片及时电镜观察拍照。
注:将所取样本尽可能固定在生活状态下,并保存样本的抗原活性;免疫电镜由于GA浓度很低微细结构变化大,2h或过夜中间换液2~3次。