自噬是细胞利用溶酶体降解途径进行自我吞食的过程,是细胞在营养不足等压力情况下维持生存的主要代谢途径。自噬主要分为三类,即巨自噬(Macroautophagy)、微自噬(Microautophagy)、分子伴侣介导的自噬(Chaperone-mediated autophagy)。自噬在肿瘤、神经退行性疾病、心血管疾病等多种疾病中发挥重要作用。
自噬发生的过程如下:
图一 自噬发生过程自噬产品介绍:
1.自噬筛选系统:
GFP-LC3 WT/MT
GFP-LC3-RFP-LC3 MT
Luciferase LC3 WT/Luciferase LC3 MT
图二 自噬筛选系统
1.自噬检测系统:
单荧光LC3病毒
pLenti-CMV-EGFP-LC3-PGK-Puro
pLenti-Ubc-EGFP-3FLAG-LC3
pLenti-EF1a-GFP-LC3-PGK-Puro
双荧光LC3病毒
AdV-mCherry-GFP-LC3:高效感染
LV-mCherry-GFP-LC3:稳定表达
AAV-mCherry-GFP-LC3:在体检测Western Blot检测
LC3 I/II、p62:提供LC3、p62抗体检测
图三 自噬检测系统
2.自噬基因过表达/干扰慢病毒:
干扰慢病毒、3个靶点/基因、干扰效率70%以上
过表达慢病毒、真核表达载体ORF克隆、对应检测抗体图四 自噬基因操作